Функцией иммунитета является защита организма от всех факторов, способных причинить вред организму, поэтому определение его статуса с использованием метода иммунограммы не теряет своей актуальности. Иммунограмма представляет собой диагностический метод, позволяющий получить представление о состоянии иммунитета человека и способности организма защищаться от воздействия бактериальных и вирусных инфекций. В совокупности с анализом клинической картины и результатов, полученных в ходе других исследований, применяется для диагностики различных заболеваний и патологических состояний. При оценке иммунного статуса учитывается количество обеспечивающих защиту организма элементов, их соотношение и активность.

1
Иммунограмма

Иммунологическое исследование показывает текущее состояние иммунитета и проводится для оценки эффективности защитных механизмов. Анализ индивидуальных параметров клеток, их количественных характеристик и функциональной активности позволяет выявить дефекты иммунитета, диагностировать различные заболевания, недостаточность механизмов защиты и аллергические реакции организма. Тесная связь иммунной системы с нейроэндокринной, чувствительность к стрессовым воздействиям, сезонным и суточным колебаниям обусловливает необходимость интерпретации полученных данных в контексте клинических проявлений и результатов дополнительных методов исследований.

Иллюстрация 1

Определенные отклонения в иммунограмме, выступающие показателями патологии в одном случае, могут являться вариантами нормы в другом, когда отсутствие некоторых компонентов иммунной защиты компенсируется количественными и качественными изменениями остальных структур. Анализ состояния иммунитета приобретает большую достоверность при оценке его в динамике.

2
Показания

Проведение иммунологического исследования оправдано только при наличии строгих показаний. Необходимость оценки иммунного статуса может быть продиктована следующими причинами:

  • наличием первичных и вторичных иммунодефицитных состояний (врожденных или приобретенных);
  • часто повторяющимися инфекционными заболеваниями;
  • хроническими инфекциями, устойчивыми к терапии;
  • аутоиммунными заболеваниями (аутоиммуный тиреоидит, инсулинзависимый сахарный диабет и другие);
  • аллергическими заболеваниями;
  • онкологическими заболеваниями;
  • химиотерапией;
  • лимфопролиферативными заболеваниями;
  • планирующимися сложными оперативными вмешательствами;
  • развитием послеоперационных осложнений;
  • трансплантацией органов;
  • необходимостью осуществления динамического контроля за приемом иммуномодуляторов;
  • решением вопроса о возможности проведения прививок детям с признаками иммунодефицита;
  • анорексией;
  • развитием серьезных осложнений в ответ на проводимую терапию.

Изображение 2

В ряде случаев иммунологическое исследование назначается при беременности, когда имеются данные о наличии у матери некоторых вирусных и аутоиммунных заболеваний, СПИДа, а также если предполагается развитие резус-конфликта.

Противопоказаниями для выполнения иммунограммы выступают инфекционные заболевания в стадии обострения, протекающие с высокой температурой, менструальные кровотечения у женщин.

При выявлении отклонений от нормы и возникновении необходимости в повторном анализе он должен проводиться в той же лаборатории, что и предыдущий.

2.1
Подготовка к анализу

Исследование проводится утром натощак. Накануне исключается прием алкоголя, медикаментов, употребление продуктов-аллергенов, смена часовых поясов, значительные физические и психические нагрузки.

При приеме жизненно важных лекарственных препаратов нужно сообщить об этом врачу.

Кровь для исследования отбирается из вены в две (иногда больше) пробирки, одна из которых содержит антикоагулянт. В некоторых случаях для проведения исследования подходит капиллярная кровь (из пальца).

3
План лабораторного исследования

Человеческий иммунитет представлен двумя типами: врожденным и приобретенным, причем последний имеет клеточное и гуморальное звено. Врожденные иммунные механизмы активируются тотчас после контакта с инфекционным агентом, после чего включаются приобретенные механизмы. Гуморальный и клеточный ответ реализуют Т- и В-лимфоциты, антитела и цитокины.

В соответствии с этим иммунологическая диагностика проводится по следующему плану:

  • оценка Т-звена: количество Т-лимфоцитов, их подвидов;
  • оценка В-звена: количество В-лимфоцитов, уровень иммуноглобулинов;
  • фагоцитарное звено: количество нейтрофилов и моноцитов, активность фагоцитоза;
  • система комплемента: общий комплемент, С3 и С4.

Изображение 3

Грубые нарушения в работе защитной системы выявляются при проведении тестов I уровня. Тестирование включает:

  • подсчет общего и относительного числа лимфоцитов;
  • подсчет числа Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов;
  • анализ фагоцитарной активности нейтрофилов;
  • определение иммуноглобулинов (Ig A, Ig G, Ig M);
  • титр комплемента.

Если возникает необходимость в углубленном исследовании, проводится тестирование II уровня, включающее:

  • определение подвидов Т- и В-лимфоцитов;
  • выявление комплексов "антиген-антитело-белки комплемента" (ЦИК);
  • пролиферативный ответ лимфоцитов на митогены или антигены;
  • определение содержания цитокинов;
  • идентификацию индекса Т-хелпер/Т-супрессор;
  • оценку активности киллерных лимфоцитов;
  • реакцию бласттрансформации лимфоцитов;
  • НСТ-тест;
  • оценку продукции антител различной специфичности и др.

4
Интерпретация

Расшифровка иммунограммы производится в соответствии с определенным планом. В первую очередь оценивается количество кровяных клеток и подсчитывается число лейкоцитов, причем значение имеет не только относительное, но и абсолютное их значение. Это необходимо для определения звена иммунитета, в котором произошел сбой.

Лейкоциты в норме:

ПоказательКонцентрация у мужчинКонцентрация у женщин
Лейкоциты4,2-9,1 х 1093,9-10,3х109
Нейтрофильные лейкоциты: палочкоядерные, сегментоядерные1-7% (0,04-0,4 х 109 /л ), 45-71% (1,9-5,6 х 109 /л)1 -7% (0,04-0,4 х 109 /л ), 45-71% (1,9-5,6 х 109 /л)
Лимфоциты18-38% (1,3-3,4 х 109 /л )18-38% (1,3-3,4 х 109 /л )

Изображение 4

4.1
Неспецифический иммунитет

Система врожденного иммунитета представлена макрофагами, эозинофилами, дендритными клетками, полиморфно-нуклеарными клетками (лейкоцитами), IFN-продуцирующими клетками, а также белками острой фазы, ферментами, интерферонами и хемокинами. Она не обладает иммунной памятью и специфичностью.

Ее характеризуют следующие показатели:

  • количество моноцитов и нейтрофилов;
  • показатели фагоцитоза;
  • количество естественных киллеров;
  • титр комплемента;
  • концентрация лизоцима в секреторных жидкостях.

4.2
Фагоциты

К ним относятся нейтрофилы и макрофаги. Фагоциты предоставляют антигены Т- и В-лимфоцитам, выполняя основные функции неспецифической защиты.

Дефекты фагоцитоза проявляются тяжелыми бактериальными и грибковыми инфекциями дыхательной системы, ротовой полости, кожи. Они могут приводить к задержке физического и умственного развития. Количество нейтрофилов при этом может быть нормальным, сниженным или повышенным.

Для оценки поглотительной способности фагоцитов исследуют фагоцитарную активность клеток, которая определяется:

  • количеством активных фагоцитов (числом фагоцитирующих клеток в 1 литре крови);
  • фагоцитарным числом (средним количеством микроорганизмов либо латексных частиц, которое поглощает одна клетка);
  • фагоцитарной емкостью крови (количеством микроорганизмов либо латексных частиц, поглощенных клетками, содержащимися в 1 литре крови);
  • фагоцитарным показателем (процентом клеток-участников фагоцитоза);
  • индексом завершенности фагоцитоза.

В норме фагоцитарное число составляет 5-9 микроорганизмов; процент фагоцитоза - 65-95%; в течение 2 часов фагоцитами разрушается 95% бактерий.

Повышение показателей фагоцитарной активности характерно для воспаления бактериальной природы, лейкоцитоза, аллергических реакций, аутоиммунных заболеваний и реакции на трансплантат.

Картинка 5

Снижение показателей наблюдается в следующих случаях:

  • наличие у пациентов хронических воспалительных заболеваний (бактериальных и вирусных);
  • врожденные дефекты системы фагоцитоза;
  • синдром Чедиака – Хигаси;
  • некоторые хромосомные болезни;
  • аутоиммунные заболевания;
  • болезни иммунных комплексов;
  • дефицит иммуноглобулинов, комплемента;
  • проведение химиотерапии;
  • после курса радиолечения или воздействия ионизирующего излучения;
  • вторичные и первичные иммунодефициты;
  • новообразования;
  • тяжелые стрессы;
  • синдромы потери белка.

4.3
Система комплемента

Представлена белковыми молекулами, которые вырабатываются макрофагами и клетками печени. В норме они неактивны. Активация комплемента приводит к разрушению клеточных стенок за счет запускаемых реакций.

Дефекты комплемента приводят к развитию системных аутоиммунных заболеваний или тяжелых рецидивирующих бактериальных инфекций.

Активность комплемента повышается при аутоиммунных патологиях и аллергических реакциях. При анафилактическом шоке он отсутствует.

В норме:

  • титр комплементой активности у взрослых составляет 60-140 ЕД/мл;
  • содержание С3 в крови — 0,54-1,21 г/л;
  • содержание С4 в крови - 0,22-0,55 г/л.

Система приобретенного иммунитета представлена клеточными и гуморальными компонентами. Клеточные компоненты включают в себя лимфоциты и их подвиды, макрофаги и дендритные клетки. Гуморальными компонентами являются антитела и интерлейкины. Приобретенный иммунитет обладает свойством "памяти" и специфичностью.

4.4
Клеточное звено иммунитета

Состояние клеточно-опосредованного иммунитета определяется концентрацией Т-лимфоцитов и их подвидов, пролиферативной активностью и кожными реакциями гиперчувствительности отсроченного типа. Т-лимфоциты отличает наличие особого рецептора - кластера дифференцировки CD2. В соответствии с этим зрелые лимфоциты обозначаются как CD3 (CD3+CD19-CD45+), Т-хелперы - CD3+CD4+CD8-CD45 +, Т-цитотоксики - CD8, нормальные киллеры - CD16.

Изображение 6

В нормальной иммунограмме содержание Т-лимфоцитов следующее:

Т-лимфоциты и их подвидыКонцентрация % /(*10 9/л)
Все Т-лимфоциты, из которых60-83/0,96-2,05
CD3+αβTcR+γδTcR-CD45 +59,8-79,2/0,922-1,959
CD3+γδTcR+αβTcR-CD45 +1,4-6,3 /0,036-0,041
CD3+CD4+CD8-CD45 + (Т-хелперы)34-57/0,58-1,12
CD4+CD45RA-CD45R0 + (Т-хелперы памяти)6-26/0,070-0,703
CD4+CD45RA+CD45R0 + (Т-хелперы недифференцированные)22-42/0,282-1,143
CD3+CD8+CD4-CD45 + (Т-цитотоксики)17-34/0,37-0,96
CD3+CD56+CD16+CD45 + (T-NK-лимфоциты)0,51-6,2/0,008-0,167
CD4+HLA-DR+CD25+CD45 + (Т-лимфоциты с рецептором к интерлейкину-2)0,51-6,2/0,008-0,167
CD4+CD25brightCD127negCD45 + (Т-регуляторы)0,7-1,4/0,01-0,019
Соотношение Т-хелперы/Т -цитотоксики1,6-2,1

Клеточный иммунитет обеспечивает организм способностью противостоять вирусным и грибковым агентам, канцерогенам, тканевым гельминтам и условно-патогенным возбудителям, реализует поздние аллергические реакции. Уменьшение концентрации зрелых Т-лимфоцитов обусловлено различными иммунодефицитными состояниями, возникающими по следующим причинам:

  • хронические инфекции;
  • тяжелые оперативные вмешательства;
  • воздействия токсинов;
  • ожоговая болезнь;
  • прием химиопрепаратов и глюкокортикостероидов.

Рост абсолютного числа Т-лимфоцитов может свидетельствовать о гиперактивности иммунной системы, возникающей при лимфолейкозах (острых и хронических). При стимуляции иммунитета антигенами происходит повышение абсолютного количества Т-хелперов, что сопровождается ростом числа клеток - участников иммунного процесса. При гипореактивном синдроме, характерном для некоторых иммунодефицитов, наблюдается уменьшение количества Т-хелперов в крови.

Уменьшение количества Т -супрессоров свидетельствует о нарушении клеточно-эффекторного реагирования при хронических вирусных инфекциях, злокачественных новообразованиях, приеме химиопрепаратов.

Натуральные киллеры (CD3-CD16+CD56+CD45 +) осуществляют неспецифическое распознавание антигена, обеспечивая защиту от опухолевых агентов и вирусных частиц.

На иммунограмме:

  • Естественные киллеры - 9-19%/0,13-0,39*109/л;
  • Цитолитические лимфоциты - 8,6-17,8%/0,124-0,364*109/л;
  • Цитокинпродуцирующие лимфоциты - 0,4-1,2%/0,006-0,026*109/л.

Картинка 7

4.5
Состояние гуморального иммунитета

Оценивается по количеству В-лимфоцитов (CD19, CD20, CD22) и иммуноглобулинов.

В-лимфоциты (CD3-CD19+HLA-DR-CD45 +) представляют собой лимфоциты, способные продуцировать антитела.

В нормальной иммунограмме содержание В-лимфоцитов следующее:

В-лимфоциты и их подвидыКонцентрация % /(*10 9/л)
В-лимфоциты8-18/0,20-0,39
CD19+CD5-CD27+CD45 + (В-лимфоциты памяти)1,9-6,9 /0,013-0,042
CD19+CD5+CD27-CD45 + (В1-лимфоциты)0,6-2,2 /0,023-0,116
CD19+CD5-CD27-CD45 + (В2-лимфоциты)6,4-15,0/0,085-0,325

Повышение концентрации В-лимфоцитов наблюдается при:

  • острых инфекциях различной этиологии;
  • СПИДе (в начальном периоде);
  • хронических болезнях печени (гепатит вирусной этиологии, цирроз);
  • аутоиммунных болезнях (инсулинзависимый сахарный диабет, аутоиммунный тиреоидит, системные болезни соединительных тканей);
  • болезни Бенье-Бека-Шауманна;
  • муковисцидозе;
  • заболеваниях кишечника;
  • моноклональной гаммапатии;
  • инфекционном мононуклеозе;
  • хроническом лимфолейкозе;
  • при повторном инфицировании в остром периоде.

Снижение числа всех В-лимфоцитов возможно при физиологическом недостатке гаммаглобулинов у детей (до 3–5 месяцев), врожденной агаммаглобулинемии, лечении иммунодепрессантами, спленэктомии, недостаточности растворимых компонентов иммунной защиты.

Пролиферативная активность лимфоцитов оценивается по реакции бласттрансформации лимфоцитов. Спонтанная бласттрансформация повышена при бактериальных и вирусных инфекциях, аутоиммунных и аллергических заболеваниях, у новорожденных.

Иммуноглобулины - это пептидные молекулы плазмы крови, образующиеся под влиянием антигенов. Основные классы иммуноглобулинов представлены IgA, IgG, IgM и IgE.

Иллюстрация 8

4.6
Иммуноглобулины А

Синтезируются плазмоцитами слизистых оболочек в ответ на воздействие чужеродных агентов. Преимущественно содержатся на поверхности слизистых оболочек, в секретах желез дыхательного, пищеварительного тракта, мочеполовой системы, а также в молоке и молозиве. Иммуноглобулины препятствуют прикреплению вредоносных агентов к поверхности клеток, обеспечивая им защиту. Через плаценту не проникают, поэтому у новорожденных содержатся в минимальных количествах. Поступают в организм при грудном вскармливании от матери, достигая характерных для взрослых значений к пятилетнему возрасту ребенка. Составляют 10-15% от всех иммуноглобулинов крови.

Нормы Ig A:

ВозрастСодержание в г/л
До 3 месяцевотсутствует
от 3 до 12 месяцев0,02-0,7
от 12 месяцев до 5 лет0,09-1,0
от 5 до 12 лет0,52-2,03
от 12 до 16 лет0,58 -2,49
от 16 до 20 лет0,63-3,49
от 20 лет1,0-4,52

4.6.1
Заболевания, связанные с изменением нормального уровня IgA

Повышение IgA:

  • анафилактоидная пурпура;
  • цирроз печени;
  • IgA-миелома;
  • аутоиммуные болезни;
  • болезнь Бенье-Бека-Шауманна;
  • поражения кожи, ЖКТ, дыхательной системы и урогенитального тракта различной природы;
  • болезнь Шенлейн-Геноха;
  • средиземноморская лимфома тонкой кишки;
  • муковисцидоз;
  • гаммапатия моноклональная;
  • макроглобулинемия Вальденстрема.

Изображение 9

Снижение уровня IgA:

  • острая лимфоцитарная лимфома;
  • агаммаглобулинемия;
  • атаксия-телеангиэктазия;
  • хронический лимфолейкоз;
  • хронический миелолейкоз;
  • дисгаммаглобулинемия III типа;
  • цирроз печени;
  • наследственная телеангиэктазия;
  • IgG-миелома;
  • лимфоидная аплазия;
  • макроглобулинемия;
  • нефротический синдром;
  • болезнь Стилла;
  • воспаление толстого кишечника;
  • лямблиоз;
  • хронические грибковые поражения кожи и слизистых оболочек;
  • общий иммунодефицит;
  • гипоплазия тимуса;
  • синдром Луи-Бара;
  • атопический дерматит.

На результаты анализа могут повлиять: беременность, физическая нагрузка, лучевая терапия, состояния, приводящие к потере белка (болезни почек, кишечника), прием антидепрессантов, нейролептиков, химиопрепаратов, препаратов золота, эстрогенов и оральных контрацептивов, а также недавняя иммунизация.

4.7
Иммуноглобулины М

Синтезируются после воздействия инфекционного агента и свидетельствуют об острой фазе воспаления. Иммуноглобулины этого класса участвуют в активации комплемента, усилении фагоцитоза. Они "склеивают" бактерии и нейтрализуют вирусы. Иммуноглобулины М участвуют в защите плода от инфекций, поскольку появляются в процессе внутриутробного развития, но размер молекул не позволяет им преодолевать плацентарный барьер. Фракция Ig М составляет 5-10% от всех иммуноглобулинов крови.

Картинка 10

Нормы IgM:

ВозрастПолСодержание, г/л
до 3 мес.м/ж0,05-0,2
от 3 до 12 мес.м0,18-1,44
ж0,18-1,51
от года до 12 летм0,5-1,84
ж0,48-2,24
от 12 лет и взрослыем0,21-2,5
ж0,34-2,94

4.7.2
Заболевания, связанные с изменением уровня IgM в сыворотке крови

Повышение уровня IgM:

  • дисгаммаглобулинемия I типа;
  • цирроз печени;
  • гепатит;
  • гипер-IgM-иммунодефицит;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • системные болезни (системный гломерулонефрит, болезнь Крона и пр.);
  • макроглобулинемия;
  • трипаносомоз;
  • грибковые, вирусные и бактериальные инфекции в остром периоде;
  • инфекции внутриутробного периода (токсоплазмоз, цитомегаловирус, краснуха и др);
  • муковисцидоз;
  • моноклональная криоглобулинемия;
  • острый лимфолейкоз;
  • кандидоз;
  • моноклональная гаммапатия невыявленной этиологии;
  • хронический лимфолейкоз и др.

Картинка 11

Снижение уровня IgM:

  • агаммаглобулинемия;
  • хронический лимфолейкоз;
  • лимфоидная аплазия;
  • гепатома;
  • болезнь тяжелых цепей;
  • дисгаммаглобулинемия II типа;
  • IgA- и IgG-миелома;
  • СПИД;
  • спленэктомия;
  • амилоидная дистрофия;
  • синдром Вискотта-Олдрича;
  • воспаление толстой кишки;
  • болезни почек, протекающие с нефротическим синдромом.

На результаты анализа могут повлиять: беременность, физическая нагрузка, лучевая терапия, патологические состояния, приводящие к потере белка (нефротический синдром при гломерулонефрите, болезнь Крона, язвенный колит ), ожоговая болезнь, прием антидепрессантов, нейролептиков, метилпреднизолона, декстрана, пеницилламина, вальпроевой кислоты, химиопрепаратов, препаратов золота, эстрогенов и оральных контрацептивов, а также недавняя иммунизация.

4.8
Иммуноглобулины G

Вещества, вырабатывающиеся В-лимфоцитами в ответ на внедрение чужеродных агентов. Обеспечивают длительную защиту организма, предотвращая повторное инфицирование, поскольку обладают свойством "памяти". IgG также усиливают фагоцитоз и принимают участие в активации системы комплемента. Размер частиц позволяет им преодолеть плацентарный барьер, обеспечивая защиту новорожденного в течение первых нескольких месяцев жизни. Составляют около 70-80% от всех иммуноглобулинов крови. Синтез IgG при встрече с антигеном начинается спустя около 5 дней после появления IgM. IgG представлен подклассами G1-G4, снижение которых приводит к рецидивированию инфекции, но может остаться незамеченным при нахождении значений общего IgG в пределах нормы.

Иллюстрация 12

Нормы IgG:

ВозрастПолСодержание в г/л
до 1 мес.м3,98-17,68
ж3,95-17,39
до 12 мес.м2,07-9,51
ж2,05-9,37
до 2 летм4,77-9,23
ж4,85-9,28
до 80 летм5,48-16,26
ж5,56-16,43

4.8.3
Заболевания, связанные с изменением содержания в крови IgG

Повышение уровня IgG:

  • болезни печени (гепатит, алкогольная болезнь печени, цирроз);
  • заболевания органов дыхания, урогенитального тракта и кишечника инфекционной природы как в остром, так и в хроническом периоде;
  • выздоровление после первичного инфицирования;
  • повторная инфекция в остром периоде;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • системные болезни (неспецифический язвенный колит, аутоиммунный тиреоидит и пр.);
  • саркоидоз;
  • IgG-миелома;
  • болезнь Вальденстрема;
  • лимфомы;
  • множественный склероз;
  • муковисцидоз;
  • СПИД;
  • нейросифилис;
  • моноклональная гаммапатия неизвестной этиологии;
  • хронический лимфолейкоз и др.

Изображение 13

Снижение уровня IgG:

  • агаммаглобулинемия;
  • гипогаммаглобулинемия;
  • хронический лимфолейкоз;
  • вирусные инфекции с хроническим течением;
  • гипер-IgM-синдром;
  • лейкоз;
  • болезнь тяжелых цепей;
  • дисгаммаглобулинемия I типа;
  • IgA-миелома;
  • аллергические заболевания;
  • синдром Вискотта-Олдрича;
  • ВИЧ-инфекция;
  • недостаточность цианокобаламина (витамина В12);
  • атаксия-телеангиэктазия;
  • недостаток подклассов IgG;
  • спленэктомия;
  • заболевания почек с нефротическим синдромом;
  • воспаление толстой кишки.

Обследование проводится до начала лечения либо спустя 14 дней после его завершения.

4.9
Иммуноглобулины Е

Способны присоединяться к базофилам и тучным клеткам слизистых оболочек с их последующей дегрануляцией, высвобождением биологически активных веществ и развитием реакции гиперчувствительности. Участвуют в формировании иммунитета к глистным инвазиям и в развитии аллергических реакций.

Нормы IgE:

ВозрастСодержание, МЕ/мл
Новорожденныедо 1,5
Меньше 12 месяцевдо 15
12 месяцев - 6 летдо 60
от 6 до 9 лет0 - 90
от 9 до 16 летдо 200
Старше 16 летдо 100

4.9.4
Заболевания, связанные с изменением показателей IgE в сыворотке крови

Повышение IgE:

  • аллергические заболевания;
  • аллергический бронхолегочный аспергиллез;
  • узелковый периартериит;
  • IgE-миелома;
  • синдром Иова;
  • синдром Ди-Джоржи;
  • аплазия тимуса;
  • реакции отторжения трансплантата;
  • глистные инвазии.

Снижение уровня IgE:

  • агаммаглобулинемия;
  • гипогаммаглобулинемия;
  • синдром Луи-Бар;
  • иммунодефицитные состояния.

Решение о необходимости коррекции иммунитета может быть принято на основании результатов иммунограммы при условии, что имеют место стойкие изменения как численности, так и качественных параметров структур, осуществляющих защиту организма, соответствующие клиническим проявлениям заболевания и сопровождающиеся значительным отклонением от пограничного значения возрастной нормы.